Το Guitar Hero III, που κυκλοφόρησε το 2007, γνώρισε τεράστια εμπορική επιτυχία, πουλώντας πάνω από 14 εκατομμύρια αντίτυπα παγκοσμίως. Έλαβε επίσης την αποδοχή των κριτικών, με πολλούς να επαινούν το διευρυμένο soundtrack, το βελτιωμένο παιχνίδι και τα νέα χαρακτηριστικά του.
Το Guitar Hero III εισήγαγε αρκετές νέες καινοτομίες στη σειρά, όπως:
- Μια λειτουργία co-op που επέτρεπε σε δύο παίκτες να συνεργαστούν στο ίδιο τραγούδι
- Ένα "Battle Mode" που επέτρεπε στους παίκτες να ανταγωνίζονται μεταξύ τους σώμα με σώμα
- Ένα διευρυμένο soundtrack που περιελάμβανε πάνω από 70 τραγούδια, από μια μεγάλη ποικιλία ειδών
- Μια νέα λειτουργία παιχνιδιού που ονομάζεται "Expert+" που προκάλεσε τους παίκτες με ακόμη πιο δύσκολα γραφήματα σημειώσεων
Το Guitar Hero III θεωρείται από πολλούς το καλύτερο παιχνίδι της σειράς και έθεσε τα πρότυπα για μελλοντικά παιχνίδια Guitar Hero.