- Η σύζυγος του Οράτιο Κέιν, Μαρίνα, την οποία υποδύεται η Σοφία Μήλος: Η Marina Caim ήταν η σύζυγος του Οράτιου κατά τις πρώτες σεζόν του σόου. Αρχικά ήταν ιδιωτική ερευνήτρια που βοήθησε τον Οράτιο σε ορισμένες υποθέσεις. Ωστόσο, ο γάμος τους τελικά διαλύθηκε λόγω της αφοσίωσης του Οράτιου στο έργο του.
- Calleigh Duquesne, που υποδύεται η Emily Procter: Η Calleigh Duquesne είναι CSI Level 3 και κόρη ενός αστυνομικού του Μαϊάμι. Είναι ειδικευμένη ιατροδικαστής και είναι γνωστή για την πείρα της στην ανάλυση DNA και την ταυτοποίηση πυροβόλων όπλων.
- Natalia Boa Vista, την οποία υποδύεται η Eva LaRue: Η Natalia Boa Vista εντάσσεται στην ομάδα στην Season 5 ως CSI Level 2. Είναι πρώην μυστική αστυνομικός και έχει ένα υπόβαθρο στην ψυχολογία, κάτι που τη βοηθά να κατανοήσει τα κίνητρα των εγκληματιών.
- Η γυναίκα του Delko, Marisol Delko, την οποία υποδύεται η Elizabeth Berkley Lauren: Η Marisol Delko είναι η σύζυγος του Eric Delko. Παντρεύονται στο φινάλε της σεζόν της 4ης σεζόν. Η Marisol εργάζεται επίσης ως ντετέκτιβ ανθρωποκτονιών στο Μαϊάμι.
- Yelina Salas, που υποδύεται η Sofia Vassilieva: Η Yelina Salas μπαίνει στην ομάδα στην 9η σεζόν. Είναι κόρη ενός Ρώσου μαφιόζου και έχει γνώσεις για τις εσωτερικές λειτουργίες των εγκληματικών οργανώσεων.